2019年7月，俄罗斯向土耳其交付了首批S-400防空系统，此事使土美之间的不信任感空前加剧，土耳其国防工业局相关负责人受到了美国的制裁。该事件成为了近年来土美关系恶化的又一个分水岭，双方围绕此事也展开了新的一轮轮博弈。
部署S-400以来，美国不顾土耳其强烈反对把土从F-35战机的研发生产国家中剔除。而土耳其则先后在2019年、2020年使用该防空系统追踪美F-16战机、F-22、F-35隐形战机以测试其性能。对此，美国表示强烈不满。目前美国还一再拒绝了土耳其希望美国为其升级F-16战机的诉求。2020年12月，美国国会正式通过《以制裁反击美国敌人法》（CAATSA）就土耳其购买俄S-400防空系统对土耳其进行制裁，这是美国历史上首次援引该法案对北约盟国进行制裁。
美国国务卿布林肯称“土耳其购买S-400防空系统严重威胁北约安全并破坏北约内部团结，为俄罗斯军事力量进一步进入土耳其铺平了道路”。由于无法得到美F-35隐形战机，埃尔多安也曾不避讳地表示“土耳其可以引进俄罗斯苏-57隐形战机以取代F-35”。可以说，部署俄制S-400防空系统之后，土耳其与美国的关系呈现出矛盾加剧且外溢的趋向，双方不仅分歧领域愈发广泛，且在某些问题上尖锐对立，双方均在重新定位双边关系。美国国会以及战略学界均传出声音要求美国政府重新审视土耳其的“北约身份”问题以及对土军售问题。
2019年10月，土耳其在叙利亚北部发动“和平之泉”军事行动后，不久时任美国副总统彭斯、财长努姆钦突然宣布对土耳其进行金融制裁与经济封锁，土耳其股市与里拉对美元的汇率也随之暴跌。特朗普甚至在推特发文称，“如果土耳其不收敛行动（指“和平之泉”军事行动），美国将随时准备摧毁土耳其经济。”11月土耳其3名部长及部分国防部、能源部官员遭到美方制裁。
